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高中生物 | 鉴定物质成分的生化实验

2024-08-15 17:03|编辑: 雅南老师|阅读: 239

摘要

本文汇总了高考生物考纲规定的17个实验,并详细梳理了观察类实验的5个实验。每个实验都包含了原理、材料、步骤和注意事项,为高中生及家长提供全面的生物实验指导。

为了帮助高中生及家长更好地理解和准备高考生物考纲规定的17个实验,自主选拔在线安徽新高考团队特别整理了这份详细的实验汇总。从基本的生化实验到复杂的生态系统观察,这些实验覆盖了生物学的多个重要知识点。文中不仅提供了每个实验的原理和步骤,还有关键注意事项,欢迎收藏!

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鉴定物质成分的生化实验

生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

原理:还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 脂 肪 + 苏丹III 橘黄色

脂 肪 + 苏丹III橘黄色 苏丹IV 红色

蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色反应

还原糖的检测

(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。

(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。

(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)

模拟尿糖的检测

1、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果:(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析:因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖,所以没有发生反应。

脂肪的检测

(1)材料的选取:含脂肪量越高的组织越好,如花生的子叶。

(2)步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央

染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)

制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)

镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)

蛋白质的检测

(1)试剂:双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)

(2)步骤:试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)

疑难点拔:本实验为验证类实验。①葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含醛基,醛基具有还原性,可与弱氧化剂反应。与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在:a、利用斐林试剂;b、利用班氏试剂:由A液(CuSO4溶液)和B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成;c利用银氨溶液;结果出现银镜。②脂肪的鉴定可用苏丹III、苏丹IV。③蛋白质的鉴定可用双缩脲试剂、浓硝酸试剂(结果形成黄色沉淀)④斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,但二者有以下不同:a、溶液浓度不同;b、使用原理不同(斐林试剂是新配制的CU/OH2溶液;双缩脲试剂是碱性环境下的Cu2+)c、使用方法不同。

考点提示:

(1)常见还原性糖与非还原性糖有哪些?

(2)还原性糖植物组织取材条件?

(3)研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?

(4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用?

(5)还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为:

(6)花生种子切片为何要薄?

(7)转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?

(8)脂肪鉴定中乙醇作用?

(9)双缩脲试剂A、B两液是否混合后用?

参考答案:

(1)葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。

(2 )含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

(3)加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。

(4)混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。

(5)浅蓝色 棕色 砖红色

(6)只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。

(7)切片的厚薄不均匀。

(8) 洗去浮色。

(9)不能混合;先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。

DNA的粗提取与鉴定

高中生物 | 鉴定物质成分的生化实验

考点提示:疑难点拔:①制备鸡血细胞液时离心后除去上清液。②实验过程中两次加入蒸馏水的作用不同。第一次的目的是为了使外界溶液浓度大于血细胞内细胞液的浓度,细胞大量吸水胀破得到DNA;第二次的目的是降低Nacl溶液浓度到DNA溶解度最低点,这样DNA分子可以从Nacl溶液中析出。

(1)鸡血能用猪血代替吗?为什么?

(2)鸡血中为何要加柠檬酸钠?为何要弃去鸡血细胞的上清液?

(3)胀破细胞的方法?能用生理盐水吗?

(4)该实验中最好应用玻璃烧杯还是塑料烧杯?为什么?

(5)前后三次过滤时,所用纱布的层数分别是多少?为什么?

(6)若实验中所得黏稠物太少,其原因是什么?

(7)两次加入蒸馏水的目的分别是什么?

(8)实验中搅拌溶液时,为何总要沿一个方向搅拌?

(9)两次析出DNA的方法分别是什么?原理分别是什么?

(10)三次溶解DNA的液体分别是什么?原理分别是什么?

(11)鉴定DNA时为何要用两支试管?其现象分别是什么?

参考答案:

(1)不能,因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核,不能提取DNA.

(2)防止血液凝固;因为上清液是血浆,不含细胞和DNA.

(3)向血细胞中加入蒸馏水,使细胞大量吸水而胀破;不能用生理盐水,因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。

(4)最好用塑料烧杯,因为玻璃烧杯容易吸附DNA.

(5)第一次用一层纱布,有利于核物质透过纱布进入滤液;第二次用多层纱布,能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液;第三次用两层纱布,既有利于DNA透过纱布,又能防止其它杂质透过纱布。

(6)第一次加蒸馏水过少,细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布。

(7)第一次是为了使血细胞吸水胀破;第二次是为了降低氯化钠的浓度,有利于DNA有析出。

(8)防止DNA分子受到损伤。

(9)第一次是加蒸馏水,降低氯化钠的浓度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因为DNA不溶于酒精溶液。

(10)第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液,第三次用的是0.015mol/L(或2 mol/L)的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0.015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。

(11)其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色,另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。

声明:本文信息来源于网络,由自主选拔在线安徽新高考团队(微信公众号:wkqxgk)编辑排版,如有侵权,请及时联系管理员删除。

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